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      病毒樣本的裂解過程

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      病毒樣本的裂解過程

      發布日期:2022-03-08 作者:米淇 點擊:

      協和醫院近期發布新冠病毒操作指南,供有條件的實驗室參考。期間在病毒樣本的裂解過程中多次使用了桌面離心機。本文中整理了部分桌面離心機供大家參考。

      調速離心機.jpg定速離心機.jpg定速離心機.jpg

       以下為樣本的裂解的參考過程 1、用1.5ml的無菌EP管,移液器移取560μl AVL裂解液,加入5.6μl Carrier RNA,加入140μl的已滅活的待提取核酸的待測樣本,渦旋振蕩15s,室溫靜止10min。將上述EP管放入離心機內瞬時離心以去除可能殘留在EP管蓋上的裂解產物,防止污染。裂解完成后,加入560μl無水乙醇,振蕩混勻15s,將上述EP管放入離心機內瞬時離心以去除可能殘留在EP管蓋上的裂解產物,防止污染。

      2、向離心柱加入裂解產物630μl,8000轉離心1min,若離心機在生物安全柜之外,每次使用都需進行外表面消毒。更換新廢液收集管,要從離心機中小心取出離心柱,將上層離心柱轉移到新收集管中,繼續將剩余裂解產物630μl加入離心柱中,若樣本體積大于140μl時需重復此步驟,直到全部裂解產物都過柱離心,8000轉離心1min,小心將離心柱轉移到新的收集管中。 取500μl AW1加入離心柱中(注意,此處加樣操作時務必將移液器吸頭接觸離心柱內壁緩慢加樣),8000轉離心1min。小心取出離心柱,更換新的收集管。取500μl AW2加入離心柱中,14000轉離心3min,小心取出離心柱,更換新的離心柱上端收集管,置于離心機中使用Z大轉速離心1min,以確保將AW2中的殘液完全離心干凈。取無菌1.5mlEP管收集核酸,將離心柱上端小心放入1.5mlEP管中,取40-60μl的洗脫液AVE加入到離心柱中(注意:洗脫液應盡量全部覆蓋住離心柱膜),用EP管管蓋蓋住離心柱,使用無菌剪刀剪去原離心柱管蓋。室溫靜止1min,將其放入離心機中8000轉離心1min,回收核酸。丟棄離心柱,EP管中即為獲取的提取核酸,做好標記與登記。

       實驗期間共涉及多次離心操作,而操作盡可能處于生物安全柜中進行,所以體積小的桌面離心機必不可少,本文梳理了部分桌面離心機供大家參考學習。


      本文網址:http://www.casaduca.com/news/781.html

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